仪器

仪器名称:Olympus单谱线双光子正置显微镜 (FVMPE-RS) 

房间号:B311 

仪器介绍 :结合激光扫描共聚焦显微镜和双光子激发技术的技术,在激光共聚焦扫描显微镜的基础上,以红对活体样品长时程成像观察。独有四轴自动矫正,调整任一激光波长时,激光角度和位置均自动调整,达到多色激光两个光斑完全重合。配有电生理用模拟与数字信号转换器,ANALOG信号转换器能够让电生理等外部设备和双光子成像、激光刺激等功能同步。通过输入或输出信号触发电生理等外部实验设备,支持TTL, I/O信号。 Analog单元还能通过软件将电压转化为图像,对于荧光图像也可以进行同样处理,将光刺激过程中用膜片钳测量得到的电信号与采集到的图像同步,并以光强度伪彩的方式展示出来。图像工作站及分析软件能够控制所有硬件设备,包括Analog外触发信号控制等功能。对于成像结果后期能够进行海量数据三维重构,三维表面渲染,放大、旋转展示等各种图像功能。外飞秒激光作为光源,可以深入穿透组织内部并对荧光分子非线性激发,并且长波长能减小激光对生物体的损伤,减小光毒性,该双光子具有Deep Focus Mode,可以实现较传统模式更深层成像。仪器在保证较高空间分辨率(成像深度可超过1mm)的同时可支持长时程活体成像。

适用范围:

     该系统较高的成像深度,低光毒性的特点,适合对活体动物进行长时程实时成像;双光子只能激发焦面信号的原理特点,可以更加精准的做光激活,光漂白等光刺激实验。

关键技术指标: 

激光器:

单谱线IR激光器:800-1300nm波长可调

物镜:

 5x (Air, NA=0.1, WD=20mm);

 10x (多透明介质可调, NA=0.6, correction collar(cover glass:0-0.23mm,n:1.33-1.52), WD=8mm);

 25x (Water, NA=1.05, correction collar(cover glass:0-0.23mm), WD=2mm);

成像模式:宽场荧光成像、明场成像、双光子成像;

      载物台手动载物台,调节范围: 125-195mm

              快速压点Z轴:Z轴行程范围: 400um; Z轴步进精度: 1.25nm; 重复精度: 5nm; 频率: 120Hz

检测器:4通道固定检测器:外置检测器(双光子):2个GaAsp(超灵敏探测器),2个PMT(光电倍增管)

扫描模式:高分辨(Galvano-mirror)和高速扫描模式(Resonant-scanner)可选,高速扫描模式下扫描速度30fps@512×512,438fps@512x32。

电生理用模拟与数字信号转换器: 6TTL信号输入口,6TTL信号输出口,4通道模拟信号输入口,1通道模拟信号输出口;

图像处理软件:FVMPE-RS basic software



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