仪器

仪器名称:

Zeiss LSM 880 倒置共聚焦显微镜  房间号:X208

仪器介绍

Zeiss LSM880倒置共聚焦荧光显微镜主要用于对培养活细胞或组织进行长时间的明场及荧光成像。该系统配备了Zeiss独有的Airyscan探测器,实现了分辨率、成像速度的同时提高。Airyscan拥有一组32阵列的GaAsP-PMT探测器,没有传统的针孔,传感器的32个微单元如同32个针孔,各自感测来自样品的光线,经由算法重新加总与归位32微单元测得的各方位信号,形成正确的清晰影像。由于没有针孔,光信号不再被针孔遮蔽,Airyscan可接受更多来自样品的光线,相当于传统针孔1.25倍的光线(1.25 AU),其32个微单元每一个相当于0.2AU的感测效果,因此可以大幅改善影像的信噪比,同时提升影像解析度与细节亮度。在波长488nm下,Airyscan的探测能力是传统共聚焦显微镜的1.7倍,XY分辨率可以达到140nm,Z轴分辨率可达到400nm。

适用范围:

倒置显微镜适用于观察培养皿中的活细胞,配有DIC成像模式,可对透明的细胞进行成像。搭载的活细胞孵育系统,可匹配35mm和60mm培养皿以及标准载玻片,可以对活细胞进行长时间连续成像和对固定样品进行高分辨率成像。适用于观察并记录脑组织切片、活细胞的荧光标记、三维图像重构,细胞生物物质、离子的定性、定量、定时和定位分布检测等,进而分析脑组织、细胞内或细胞间发生的生理、生化变化过程。

关键技术指标:

激光器:

405nm(30mW)、561nm(20mW)、633nm(5mW)、多线氩离子绿色激光器458/488/514nm(25mW);快速AOTF,8通道,通道间切换时间5微秒

物镜:

10x (Air, NA=0.45); 20x (Air, NA=0.8); 25x (Water/Glycerin/Silicone/Oil, NA=0.8, WD=0.57mm); 40x (Air, NA=0.6, WD=3.48mm); 40x (Oil, NA=1.3, WD=0.2mm); 63x (Oil, NA=1.4, WD=0.19mm)

成像模式:

普通透射光明场成像、DIC成像、荧光成像(DAPI、GFP、Cy3、Cy5),荧光光谱最小检测区间3nm

滤块参数:

DAPI: EX 365, BS FT 395, EM BP 445/50;GFP: EX BP 470/40, BS FT 495, EM BP 525/50;CY3: EX BP 545/25, BS FT 570, EM BP 605/70;CY5: EX BP 640/30, BS FT 660, EM BP 690/50

检测器:

内置2个GaAsP超高灵敏度线性检测器,2个PMT线性检测器,高灵敏度单色制冷CCD,其中一个GaAsP作为Airyscan扫描模式探测器

分辨率:

超高分辨模式XY 120nm、Z 350nm,速度5幅/秒(512×512,16位);超高分辨快速模式X 145nm、Y 180nm、Z 450nm,速度19幅/秒(512×512,16位)

扫描分辨率:

4×1至8192×8192自由选择,各通道均可达8192×8192及16位灰度级

扫描速度:

检流计:13幅/秒(512×512,16位)、430幅/秒(512×16,16位);线扫描:4线/秒至6875线/秒(512×1,16位);快扫:27幅/秒(488×488,16位);CCD画幅:38幅/秒(1936×1460)

光谱检测范围:

400nm~1000nm;采样深度14bit

扫描变倍:

最小光学变倍0.6x~40x

活细胞孵育系统:

温度控制室温至60℃、精度0.01℃;CO2自动混气0至8%、精度0.01%

加湿装置:

200ml纯水大容量加湿装置(可加热);孵育仓可匹配35mm和60mm培养皿、标准载玻片、小八孔培养槽

图像处理软件:

具光谱扫描及拆分功能(去自发荧光/串扰)、自由大图拼接、共定位分析、基本测量;生理学分析模块(ROI荧光强度均值、实时/事后离子浓度计算)、直方图分析(长度/角度/面积/强度)


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